以下是一份詳細(xì)的紫外分光光度計使用指南:
### 一、開機(jī)與預(yù)熱
1. **打開樣品室蓋**:檢查樣品室中是否放置有遮光物,若有則取出。 2. **打開電源開關(guān)**:儀器進(jìn)入預(yù)熱狀態(tài),預(yù)熱時間通常為20至30分鐘,具體根據(jù)儀器型號和說明書而定。預(yù)熱是為了確保儀器穩(wěn)定,提高測量準(zhǔn)確性。
### 二、選擇光源與波長
1. **選擇光源**:對于紫外-可見分光光度計,若需要在紫外光區(qū)(200nm\~290nm)工作,則需將光源切換至氘燈;若需要在紫外光區(qū)(290nm\~360nm)或可見光區(qū)工作,則可能需要同時點亮氘燈和鎢燈(或僅點亮鎢燈)。 2. **選擇波長**:調(diào)節(jié)波長旋鈕或輸入實驗所需的波長,選擇所需的單色光波長。
### 三、校準(zhǔn)與調(diào)零
1. **校準(zhǔn)**:目前型號較新的分光光度計具有開機(jī)自動校準(zhǔn)功能。若無自動校準(zhǔn)功能,則需在使用前參照使用說明書進(jìn)行手動校準(zhǔn)。 2. **調(diào)零**:在參比樣品池內(nèi)放入?yún)⒈葮悠罚ㄍǔ檎麴s水或空白溶液),進(jìn)行調(diào)零操作,使吸光度讀數(shù)為0.000A。若讀數(shù)不為0,則需重復(fù)調(diào)零操作,直至達(dá)到要求。
### 四、測量與數(shù)據(jù)處理
1. **測量**:將待測樣品倒入比色皿中(液體在池中高度不低于一定標(biāo)準(zhǔn),如3cm),放入樣品池內(nèi),點擊測試按鈕進(jìn)行測量。記錄測試數(shù)據(jù),包括波長、透射比、吸光度、測試時間等。 2. **數(shù)據(jù)處理**:定量測試時,通常需要先測定若干個已知濃度的待測物標(biāo)準(zhǔn)樣品,根據(jù)其吸光值與濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。目前新型號的紫外分光光度計本身具有制作和計算標(biāo)準(zhǔn)曲線的功能,具體操作方式可參照設(shè)備使用說明。不具備標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制功能的設(shè)備,可利用Excel軟件或坐標(biāo)紙輔助繪制。
### 五、關(guān)機(jī)與保養(yǎng)
1. **取出吸收池**:測量完畢后,取出吸收池,清洗并晾干后入盒保存。 2. **關(guān)閉電源**:關(guān)閉電源,拔下電源插頭。 3. **放入干燥劑**:在樣品室內(nèi)放入干燥劑,蓋上樣品室蓋,罩上防塵罩。
### 六、注意事項與常見問題處理
1. **比色皿的使用**:拿比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。清洗比色皿時,一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。不能使用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿,以免損壞。 2. **防止光電管疲勞**:不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。 3. **讀數(shù)跳動不穩(wěn)定**:可能由儀器受潮、電源線接地不良、供電電源不穩(wěn)定、高溫環(huán)境、儀器附近有陽光直射、非預(yù)期的震動、使用錯誤的比色皿、樣品揮發(fā)性大、光源燈老化、前置放大板損壞、光路被非預(yù)期移動等原因?qū)е隆?yīng)針對具體原因進(jìn)行處理,如延長預(yù)熱時間、降低環(huán)境濕度、使電源線安全接地、使用交流穩(wěn)壓電源、改善環(huán)境以適應(yīng)儀器正常使用、使用正確的比色皿、使用比色皿蓋、更換光源燈、修理或更換前置放大板、重新調(diào)試光路等。
### 七、軟件操作(針對配備軟件的紫外分光光度計)
1. **打開軟件**:先打開電腦,再打開紫外分光光度計電源,點擊打開相應(yīng)的操作軟件。 2. **連接儀器**:點擊軟件中的連接按鈕,等待系統(tǒng)自檢完畢,確保自檢項目全部通過。 3. **選擇測定方式**:在軟件中選擇所需的測定方式,如光度測定(定量)方式、光譜測定方式等。 4. **設(shè)置參數(shù)**:根據(jù)實驗要求設(shè)置參數(shù),如波長范圍、掃描速度、采樣間隔等。 5. **開始測定**:在參比光束和樣品光束下各放上空白試劑進(jìn)行基線校正后,設(shè)置樣品并點擊開始鍵開始測定。 6. **保存與查看數(shù)據(jù)**:測定完畢后保存當(dāng)前測試數(shù)據(jù),并可對已保存數(shù)據(jù)進(jìn)行查看和分析。
請注意,不同型號的紫外分光光度計在操作上可能略有差異,因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器說明書并遵循制造商的指示進(jìn)行操作。 |
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